猴唾液酸(SA)ELISA試劑盒特強,重復性好
實驗原理:試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠4壬烯醛(4-HNE)捕獲的包被微孔中,依次加入標本、品、HRP標記的檢測,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的小鼠4壬烯醛(4-HNE)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
試劑盒組成:
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ELISA (Enzyme-Linkedimmunosorbent assay)的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。這一的基本原理是:①使抗原或結合到某種固相載體表面,并保持其活性。②使抗原或與某種酶連接成酶標抗原或,這種酶標抗原或既保留其活性,又保留酶的活力。在測定時,把待測樣本(測定其中的或抗原)和酶標抗原或按不同的步驟與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與其他分開結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a物,產物的量與標本中受檢的量直接相關,所以可根據(jù)顏色反應的深淺定性或定量分析。由于酶的催化速率很高,所以可地放大反應效果,從而使測定達到很高的度。
自備材料
1)蒸餾水。
2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振蕩器及磁力攪拌器等。
猴唾液酸(SA)ELISA試劑盒特強,重復性好
樣品收集、處理及保存
1)-----操作中避免任何細胞。使用不含熱原和內的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。
2)-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒性能
1. 靈敏度的檢測濃度小于1號品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的待測品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的待測含量可根據(jù)其OD值由曲線換算出相應的濃度。